
制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片的步驟是( )
A. 解離→染色→漂洗→制片
B. 漂洗→解離→染色→制片
C. 解離→漂洗→染色→制片
D. 染色→漂洗→解離→制片
制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片的步驟是( )
A. 解離→染色→漂洗→制片
B. 漂洗→解離→染色→制片
C. 解離→漂洗→染色→制片
D. 染色→漂洗→解離→制片
答案
C
解析
觀察細胞有絲分裂實驗的步驟:解離(解離液由鹽酸和酒精組成,目的是使細胞分離開來)、漂洗(洗去解離液,防止對染色的干擾)、染色(用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料)、制片(該過程中壓片是為了將根尖細胞壓成薄層,使之不相互重疊影響觀察)和觀察(先低倍鏡觀察,后高倍鏡觀察)。
制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片的過程中,首先解離液將組織細胞分離開,然后用清水漂洗根尖,再用醋酸洋紅或龍膽紫對根尖進行染色,最后通過壓片的操作制成臨時裝片。綜上分析,C正確,ABD錯誤。
故選C。
擴展知識
有絲分裂操作實驗步驟
試劑儀器
洋蔥鱗莖,鑷子,刀片,培養皿,載玻片,蓋玻片,滴管,紗布,吸水紙,酒精燈,顯微鏡;固定液,15%鹽酸,醋酸洋紅染液,95%乙醇。
方法步驟
1、洋蔥根尖的培養
(1)培養洋蔥生根時,避免用新采收的洋蔥,因它尚在休眠不易生根。如果必須用當年剛采收的新洋蔥培養生根,則應設法打破它的休眠。常用的方法是用低濃度的赤霉素溶液浸泡洋蔥底盤,這樣可以促使其生根。培養過程中,注意每天至少換水一次,以防爛根。
(2)對于頭年收下的洋蔥,可以采用如下方法促使它生根:
①選擇底盤大的洋蔥作生根材料。
②剝去外層老皮,用刀削去老根(從底盤中央向四周削),注意不要削掉四周的“根芽”。
③用燒杯裝滿清水,放上洋蔥,放置在光照處。水要保持清潔,注意每天換水l~2次。一般2~3d即可獲得實驗所需材料(根長5cm)。
(3)固定時間取材。洋蔥根尖細胞有絲分裂的時間是有規律的。通常在每天上午10時至下午2時分裂活躍,尤其以下午2時最活躍,可在這時取材。可以把培養好的洋蔥根用卡洛氏固定液固定起來備用。因為培養一次洋蔥根不容易。
2、解離。用刀片切下長約2~3mm的根尖,放入盛有15%鹽酸和體積分數為95%的酒精溶液的混合液(1︰1)的培養皿中,解離3~5min,使根尖組織的細胞相互分開,待根尖透明酥軟即停止解離。如果要使解離加快,可以把培養皿放在酒精燈上微微加熱(不可煮沸)3~5 min。待根酥軟后,用鑷子取出。
解離充分是實驗成功的必備條件;解離的目的是用藥液溶解細胞間質,使組織細胞相互分離開。
3、漂洗。把取出的根尖放入清水漂洗約10min,也可以在培養皿口上蒙上—層紗布,用自來水細小的水流漂洗3~5min。
漂洗的目的是洗去根中多余的解離液。如果不把多余的解離液洗去,一方面會影響染色效果,因為解離液中含有HCl溶液,而用來染色的染料呈堿性;另一方面還會腐蝕顯微鏡的鏡頭。
4、染色。把漂洗好的根尖置于載玻片上,用鑷子頭截下長約3mm的根尖,其余部分丟棄,在根尖上滴一滴醋酸洋紅染液染色3~5min,如果要使染色加快,可把載玻片在酒精燈的火焰上快速過幾下(不可煮沸)。
5、裝片。在染好色的材料上蓋上蓋玻片,上面再覆一片載玻片,用拇指輕輕壓一下,使根尖組織成為均勻薄層的細胞層。
6、鏡檢
(1)低倍鏡觀察
把制成的洋蔥根尖裝片先放在低倍鏡下觀察,慢慢移動裝片,找到分生區細胞,其特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正在分裂。
(2)高倍鏡觀察
找到分生區細胞后,把低倍鏡移走,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰,直到看清細胞物像為止。
(3)仔細觀察
仔細觀察的目的是區分細胞分裂中各個時期內染色體變化的特點。可先找出處于細胞分裂中期的細胞,然后再找出前期、后期、末期的細胞,處于間期的細胞數目最多,最容易找到。
(4)在一個視野里,往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞。如果是這樣,可以慢慢地移動裝片,從鄰近的分生區細胞中尋找。
7、繪圖。在仔細觀察清楚有絲分裂各個時期的細胞的以后,繪出洋蔥根尖細胞有絲分裂的簡圖。
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